武汉益普生物科技有限公司 代理商

8 年

手机商铺

商家活跃:
产品热度:
代理商

武汉益普生物科技有限公司

入驻年限:8 年

  • 联系人:

    田凯

  • 所在地区:

    湖北 武汉市 洪山区

  • 业务范围:

    细胞库 / 细胞培养、技术服务、实验室仪器 / 设备、抗体、ELISA 试剂盒、试剂

  • 经营模式:

    生产厂商 代理商 经销商

在线沟通

技术资料/正文

原代细胞培养过程中的常见问题

179 人阅读发布时间:2022-10-31 15:16

原代细胞培养过程中的常见问题

  原代细胞与细胞系有什么区别?

  根据传统定义,自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞直接从组织分离,生命周期有限,经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。

  细胞系是不断生长、分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。

  倍增和代数有什么区别?

  倍增是培养物中细胞总数的翻倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的,是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

  接收到的冻存细胞该如何处理?

  收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

  冻存的细胞该如何开始培养?

  (1) 将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。

  (2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。

  (3) 将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。

  (4) 用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。

  (5) 打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。

  (6) 用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

  (7) 盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

  (8) 将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

  (9) 放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

  细胞培养过程中,多久更换一次培养基?

  这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

  注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。

  可以扩增培养和再次冻存原代正常人类细胞吗?

  这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞,神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞,不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次冻存。

  然而,需要注意的是再次冻存的过程可能导致细胞生长性能的改变。

  培养瓶中应该加入多少体积的培养基?

  我们推荐的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。

资料格式:

原代细胞培养过程中的常见问题.pdf

查看详细文档

上一篇

原代细胞的培养方法

下一篇

原代细胞传代方法哪有几种?

更多实验内容

询价列表

暂时没有已询价产品

快捷询价 发送名片
    当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。